國產av 果凍傳媒 肛交 (Arg)9, FAM - Labeled_细胞_荧光_商议进展
- 发布日期:2025-04-09 22:09 点击次数:143

基本信息 英文称号:(Arg)9, FAM - Labeled 中语称号:6 - 羧基荧光素(FAM)标记的九聚精氨酸 氨基酸序列:由九个精氨酸(Arg)构成的线性多肽链,且在特定位置贯串一个 FAM 荧光基团。 单字母序列:RRRRRRRRR - FAM 三字母序列:Arg - Arg - Arg - Arg - Arg - Arg - Arg - Arg - Arg - FAM 分子量:九聚精氨酸部分分子量约为 1292.6 Da,FAM 分子量约为 389.38 Da ,举座分子量因贯串阵势及是否存在其他修饰而略有不同,大概在 1682 Da 傍边(未探究贯串部分零散原子质地)。 分子式:九聚精氨酸部分分子式为 C₆₃H₁₁₈N₃₀O₉ ,FAM 分子式为 C₂₀H₁₂O₅ ,好意思满分子需探究贯串部分,一般包含 C、H、N、O 等元素 。 等电点:约 12.0。由于精氨酸侧链的胍基在生理 pH 下带正电,且胍基的碱性较强,在通盘分子中占主导地位,因此 (Arg) 9, FAM - Labeled 的等电点远高于中性 pH,呈强碱性。 CAS 号:现在无明确公开的特定 CAS 号。 结构信息 多肽部分:九个精氨酸通过肽键轮番贯串酿成线性结构。精氨酸的侧链含有胍基,胍基在水溶液中可质子化带正电荷,使通盘多肽链带强正电,具有精粹的亲水性。由于胍基间的静电摒除作用,多肽链在溶液中倾向于伸展构象,但也会受到溶剂环境、离子强度等成分影响而发生一定进程的卷曲或折叠。 荧光标记部分:FAM 通过化学贯串臂与九聚精氨酸中的一个精氨酸残基(常见于 N 端或 C 端)相连。FAM 具有三环芳烃结构,包含两个苯环和一个氧杂蒽环,这种刚性结构赋予其荧光特质。贯串臂的长度和化学性质会影响 FAM 与多肽的相对位置和取向,进而影响荧光的辐照遵循以及多肽的举座构象和性质。 伸开剩余75% 作用机理及商议进展 作用机理 细胞穿透:(Arg) 9 具有优异的细胞穿透智力。其带正电的胍基可与细胞膜名义带负电的磷脂头部等基团发生静电相互作用,通过吸附介导的内吞路线或径直穿过细胞膜等阵势参预细胞内。一朝参预细胞,与之相连的 FAM 荧光基团可行动示踪标记,用于监测多肽在细胞内的分辨、转运以及与其他生物分子的相互作用。 荧光示踪:FAM 在特定波长的光(频频为 488 nm 傍边)引发下会辐照绿色荧光(辐照峰约在 520 nm)。诈欺这一特质,(Arg) 9, FAM - Labeled 可用于多种生物分析时代。举例在荧皎洁微镜下,可径直不雅察其在细胞、组织切片中的位置和指导轨迹;在流式细胞术中,通过检测荧光强度可定量分析细胞对该多肽的吸收情况。 商议进展 细胞生物学商议:在细胞生物学范围,(Arg) 9, FAM - Labeled 常被用于商议细胞吸收机制、细胞内输送路线以及细胞内吞能源学等。商议发现不同细胞类型对其吸收遵循存在各异,且吸收经由可被多种成分调整,如温度、能量代谢扼制剂、细胞膜流动性调整剂等。通过对这些成分的商议,有助于潜入通晓细胞穿透肽的作用机制,为优化药物寄递系统提供表面依据。 药物寄递商议:行动药物寄递载体的模子分子,(Arg) 9, FAM - Labeled 被庸碌商议。商议东谈主员尝试将各式调感性物资(如核酸、小分子药物、卵白质等)与该多肽偶联,诈欺其细胞穿透智力将药物寄递至细胞内。现在在细胞实际和动物实际中已赢得一定遵循,举例在基因调理商议中,将 (Arg) 9, FAM - Labeled 与小过问 RNA(siRNA)贯串,可有用将 siRNA 寄递至细胞内,收尾对特定基因抒发的调控。然则,若何收尾药物的精确开释、裁汰载体的细胞毒性以及培植寄递遵循已经刻下商议的要点和难点。 溶化保存 溶化:易溶于水、缓冲液(如磷酸盐缓冲液 PBS,pH 7.2 - 7.4),在生理盐水中也能较好溶化。溶化时可接收顺心搅动或超声治理(提防超声功率和时辰,幸免过度治理导致多肽结构任性和荧光淬灭)加快溶化。若在老例溶剂中溶化性欠佳,可尝试在弱碱性条款下(如加入小数氨水调整 pH 至 8 - 9)促进溶化,因为精氨酸在碱性环境中的溶化度有所增多。 保存:粉末景象时,需密封保存在 -20℃或更低温度,以防患多肽降解和 FAM 荧光基团的氧化、光漂白等。幸免反复冻融,提出将其分装成小份保存。若为溶液景象,添加适量防腐剂(如叠氮化钠,但用于细胞实际时需严慎,因其具有细胞毒性)后,可在 4℃短期保存,永远保存则需置于 -80℃。同期,要提防避光保存,因为 FAM 对光明锐,光照会导致荧光强度渐渐裁汰。 干系多肽 (Arg) n 系列多肽(n≠9):如 (Arg) 4、(Arg) 6 等,跟着精氨酸重叠次数的改造,多肽的电荷密度、细胞穿透智力以及与 FAM 诱惑后的空间构象和荧光性质王人会发生变化。通过对比商议不同 n 值的 (Arg) n, FAM - Labeled,可潜入了解精氨酸个数对多肽功能和荧光示踪效果的影响。 其他细胞穿透肽(CPPs)与 FAM 标记物:举例 TAT 肽(YGRKKRRQRRR)与 FAM 贯串酿成的 TAT - FAM。TAT 肽和 (Arg) 9 王人具有细胞穿透智力,但氨基酸序列和结构不同,在细胞穿透机制、遵循以及与 FAM 诱惑后的荧光自若性、细胞内分辨等方面存在各异,可用于对比商议不同细胞穿透肽的特质,为优化细胞穿透肽 - 荧光标记物的筹画提供参考。 干系文件 Futaki S, Suzuki T, Ohashi W, et al. Arginine - rich peptides. An abundant source of membrane - permeable peptides having potential as carriers for intracellular protein delivery. J Biol Chem. 2001 Aug 17;276 (33):30319 - 30325. 该文件详备发扬了精氨酸富集多肽的细胞穿透特质,为 (Arg) 9, FAM - Labeled 的商议奠定了基础。 Wender PA, Mitchell DJ, Pattabiraman K, et al. The design, synthesis, and evaluation of molecules that enable or enhance cellular uptake: peptoid molecular transporters. Proc Natl Acad Sci U S A. 2000 Dec 5;97 (25):13003 - 13008. 著述对细胞穿透肽干系表面和应用商议进行了探讨,对通晓 (Arg) 9 的细胞穿透机制及应用有舛错参考价值。 Akhtar S, Benter IF. Fluorescently labeled cell - penetrating peptides: a useful tool to study cellular uptake mechanism and intracellular trafficking. AAPS J. 2011 Sep;13 (3):413 - 422. 该文件有益针对荧光标记的细胞穿透肽进行了综述,包括其在细胞吸收机制和细胞内输送商议中的应用,与 (Arg) 9, FAM - Labeled 的商议密切干系。 供应商:上海楚肽生物科技有限公司國產av 果凍傳媒 肛交
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